一、準備工作

    （一）微柱凝膠試劑卡的準備：觀察外觀，如有干膠、雜質、氣泡不可使用，之后將卡放置室溫（18－25℃）平衡，再用專用離心機離心5分鐘。

    （二）檢測標本的準備：

     1．紅細胞懸液的制備：將受血者與獻血者的紅細胞和血漿分離，各取其壓積紅細胞10ul，分別加入含1.0－1.2毫升紅細胞稀釋液的兩個試管中，外觀應為均勻淡紅色，無絮狀物和血塊。

     2．血清標本的制備：采集被檢對象靜脈血，放入含兔腦粉或其它促凝劑的試管中，10分鐘后離心，取上清。

二、操作步驟

      1．將準備好的抗人球蛋白交叉配血卡做好標記。

      2．將獻血者紅細胞懸液1滴（或50μl）與受血者血清1滴（或50μl）先后加入主側管中。

      3．將受血者紅細胞懸液1滴（或50μl）與獻血者血清1滴（或50μl）先后加入次側管中。

      4．加樣后的試劑卡，置37℃孵育器中孵育15分鐘。

      5．使用專用離心機離心5分鐘（900rpm2分鐘，1500 rpm3分鐘），取出肉眼觀察結果。

三、結果判定

     1．陰性結果：紅細胞完全沉降于凝膠管底部，表明受血者與獻血者血型相合。

     2．陽性結果：紅細胞凝集塊位于凝膠表面或凝膠中，表明受血者與獻血者血型不相合。

四、注意事項

  1．應用直接抗人球蛋白微柱凝膠免疫試驗檢測病人紅細胞時，一定要用適量EDTA的試管采血液標本，該標

     本不能放入4℃-10℃冰箱保存，以避免紅細胞病人體外致敏所致假陽性反應。

  2．紅細胞標本一定不能被細菌污染，否則出現假陽性反應。盡可能應用當日采集的新鮮血做本試驗。如不

     得不用過夜血或陳舊血，則必須首先用該標本做陰性對照試驗，以確定該標本是否可以做本實驗。

  3．血清標本：血清標本必須充分去纖維蛋白，否則標本中纖維蛋白在微柱凝膠中析出，阻礙陰性紅細胞沉

     淀，呈假陽性反應。

  4．如在微柱凝膠管中出現溶血現象，強烈提示為紅細胞抗原抗體陽性反應，也不排除其他原因所致溶血，

     故對此標本一定認真分析，并向上級主管技術人員報告并討論其原因。

  5．每日試驗前，先取出微柱凝膠卡放置至室溫。

  6．試劑卡應放在18-25℃儲存，如若長期放在4℃冰箱，建議每1-2個月取出，用專用離心機離心一次，以防

     止干膠或產生氣泡。